
新鮮的細(xì)菌培養(yǎng)物應(yīng)生長至指數(shù)生長晚期或穩(wěn)定期早期(細(xì)菌濃度約為10°個(gè)/mL),生長已達(dá)穩(wěn)定期晚期的培養(yǎng)物不能使用。試驗(yàn)中所用的培養(yǎng)物中的活菌度應(yīng)較高?;罹瓤筛鶕?jù)細(xì)菌生長曲線的歷史性對(duì)照數(shù)據(jù)確定,或在每次試驗(yàn)時(shí)通過滴片測定活菌數(shù)。
GB/T 21786-2008 化學(xué)品 細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)方法
GBZ/T 240.8-2011 化學(xué)品毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和試驗(yàn)方法 第8部分:鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)
在鼠傷寒沙門氏菌或大腸桿菌中檢測需要氨基酸菌株(分別為組氨酸和色氨酸)的突變,以產(chǎn)生一株不依賴外界提供氨基酸的菌株。通過化學(xué)品細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn),可以檢測化學(xué)品(有殺菌作用的除外)的致突變性。
健明迪檢測動(dòng)物毒理試驗(yàn)中心,提供毒理檢測,可以開展化學(xué)品細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn),報(bào)告具有CMA和CNAS資質(zhì)。
細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)應(yīng)用需要氨基酸的鼠傷寒沙門氏菌和大腸桿菌株去檢測由DNA的一個(gè)或數(shù)個(gè)堿基對(duì)的置換、增加或缺失造成的點(diǎn)突變。本試驗(yàn)的原理是檢測試驗(yàn)株中存在的回復(fù)突變并恢復(fù)合成必需氨基酸的能力。
發(fā)生回復(fù)突變的細(xì)菌能在缺乏特定必需氨基酸的條件下生長,而親代菌株則不能生長,故能檢出。
當(dāng)營養(yǎng)缺陷型菌株在受試樣品作用下發(fā)生回復(fù)突變后,即恢復(fù)了合成特定氨基酸的能力,因此可以在不含該氨基酸的培養(yǎng)基上形成菌落,而那些沒有發(fā)生突變的菌株和突變菌株的親代菌株則因無法合成特定氨基酸而不能在不含該氨基酸的培養(yǎng)基上形成菌落。




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